分选器的工作原理

　　用免疫磁珠做细胞分选是高效简捷的免疫细胞及其它细胞的分离纯化方法，今天，借着我们跟大家聊一下MACS（magnetic-activatedcellsorting）磁珠分选器的原理及在肿瘤研究中的应用，希望对大家有用。
磁珠分选器原理：
MACS分选是基于细胞表面抗原能与连接有磁珠的特异性单抗相结合，在外加磁场中通过抗体与磁珠相连的细胞被吸附而滞留在分选柱内，而无该种表面抗原的细胞由于不能与连接有磁珠的特异性单抗相结合而没有磁性，不在分选柱内停留，进而使细胞得以分离。分为有柱式分选和无柱式分选。
分选策略
（1）有柱式分选-阳性分选（磁珠标记的细胞为目的细胞）
①磁珠标记：样品与磁珠孵育15min左右；
②阴性组分先行流出：孵育后的样品过柱处理，标记磁珠的细胞在磁场的作用下吸附到MACS分选柱子上，没有被标记的细胞（阴性组分）先行流到试管中；
③洗脱阳性组分：把MACS分选柱子从磁分选器上拿下来，这时磁珠是没有磁力的，故洗脱获得阳性组分，收集后用于做后续实验。
（2）有柱式分选-去除分选/阴性分选（磁珠标记的细胞为非目的细胞）
①磁珠标记：非目的细胞被生物素化的抗体混合物标记，然后使用抗生素MACS微珠进行磁性标记；
②阳性组分先行流出：孵育后的样品过柱处理，标记磁珠的细胞在磁场的作用下吸附到MACS分选柱子上，没有被标记的细胞（目的细胞）先行流到试管中，收集后用于做后续实验。
（3）多重分选策略-获得多参数细胞
一般是先“阴性分选”再“阳性分选”
（4）血磁珠分选技术
MACSxpress技术可以直接从全血中用去除分选的方法分离到目的细胞，不需要ficoll离心和裂解红细胞。MACSxpress系统包括分选试剂、混匀器和分选器，其中，分选器不太一样，具有很好的兼容性，5ml，15ml和50ml的离心管都能使用。
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